薄層色譜實驗原理

1、原理：  薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又稱薄層層析，屬于固－液吸附色譜。樣品在薄層板上的吸附劑（固定相）和溶劑（移動相）之間進(jìn)行分離。由于各種化合物的吸附能力各不相同，在展開劑上移時，它們進(jìn)行不同程度的解吸，從而達(dá)到分離的目的。

2、薄層色譜的用途：   

①化合物的定性檢驗。（通過與已知標(biāo)準(zhǔn)物對比的方法進(jìn)行未知物的鑒定）   在條件一致的情況，純碎的化合物在薄層色譜中呈現(xiàn)一定的移動距離，稱比移值（Rf值），所以利用薄層色譜法可以鑒定化合物的純度或確定兩種性質(zhì)相似的化合物是否為同一物質(zhì)。但影響比移值的因素很多，如薄層的厚度，吸附劑顆粒的大小，酸堿性，活性等級，外界溫度和展開劑純度、組成、揮發(fā)性等。所以，要獲得重現(xiàn)的比移值就比較困難。為此，在測定某一試樣時，用已知樣品進(jìn)行對照。

   Rf=原點到組分斑點中心的距離/原點到溶劑前沿的距離

②快速分離少量物質(zhì)。 （幾到幾十微克，甚至0.01µg）  

      ③跟蹤反應(yīng)進(jìn)程。在進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)時，常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失，來判斷反應(yīng)是否完成。  

④化合物純度的檢驗（只出現(xiàn)一個斑點，且無拖尾現(xiàn)象，為純物質(zhì)。）  此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。